Diferença entre eletroforese de gel e página de SDS | Gel Electrophoresis vs SDS Page
Diferença-chave - Electroforese em gel vs SDS Page
A eletroforese em gel é uma técnica que separa macromoléculas em um campo elétrico. É um método comum na biologia molecular para separar DNA, RNA e proteínas de misturas de acordo com seus tamanhos moleculares. SDS Page é um tipo de eletroforese em gel que é usado para separar proteínas de uma mistura de proteínas com base em seus tamanhos. A eletroforese em gel é um termo usado para se referir à técnica normal aplicada para DNA, RNA e separação de proteínas enquanto SDS Page é um único tipo de eletroforese em gel. Esta é a principal diferença entre a eletroforese em gel e a página SDS.
ÍNDICE
1. Visão geral e diferença de chave
2. O que é Gel Electrophoresis
3. O que é SDS Page
4. Comparação de lado a lado - Geltroforia de gel vs SDS Página
5. Resumo
O que é eletroforese em gel?
A eletroforese em gel é uma técnica comum utilizada em laboratórios para separar moléculas carregadas, como DNA, ARN, proteínas, etc. de suas misturas. Um gel é usado em eletroforese em gel. Atua como uma peneira molecular. Existem dois tipos de géis usados em eletroforese em gel, nomeadamente agarose e poliacrilamida. A seleção de um gel e preparação de gel são fatores importantes a serem considerados em eletroforese em gel, uma vez que o tamanho de poro do gel deve ser cuidadosamente manipulado para uma boa separação de moléculas através de eletroforese em gel. A eletroforese em gel possui um campo elétrico ligado a duas extremidades do gel. Uma extremidade do gel mostra uma carga positiva enquanto a outra extremidade é carregada negativamente.
O DNA e o ARN são moléculas carregadas negativamente. Uma vez que são carregados no gel da extremidade negativa do gel e aplicados no campo elétrico, eles migram através dos poros do gel em direção à extremidade carregada positivamente do gel. A velocidade da migração depende da carga e do tamanho da molécula. As moléculas menores migram facilmente através dos poros do gel do que moléculas maiores. Assim, moléculas menores viajam uma longa distância através do gel e as moléculas maiores viajam uma curta distância. Para observar a circulação de moléculas no gel, são utilizados tipos especiais de corantes. O campo elétrico é aplicado por um certo período de tempo e parou para evitar a perda de moléculas e manter as moléculas em suas posições viajadas. Bandas diferentes podem ser observadas no gel.Essas bandas representam as moléculas de diferentes tamanhos. Assim, a eletroforese em gel é útil para diferenciar as moléculas de acordo com os seus tamanhos.
A eletroforese em gel é incorporada em várias técnicas como técnica preparativa em biologia molecular, como PCR, RFLP, clonagem, seqüenciamento de DNA, mancha de Southern, mapeamento de genoma, etc.
Figura 01: Gel de agarose Eletroforese
O que é SDS Page?
A eletroforese em gel de poliacrilamida de dodecilsulfato de sódio (página SDS) é um tipo de eletroforese em gel usada para separar proteínas. Quando a eletroforese em gel é usada para separar proteínas, são necessários tratamentos especiais, uma vez que as proteínas não são carregadas negativamente como DNA e RNA e não migram para a extremidade positiva ou final negativa. Assim, as proteínas são desnatadas e revestidas com uma carga negativa antes da eletroforese em gel. É feito usando um detergente chamado dodecilsulfato de sódio (SDS). A eletroforese em gel que utiliza SDS e um gel de poliacrilamida para o meio de suporte é conhecida como SDS Page. Esta técnica é comumente utilizada em bioquímica, genética, forense e biologia molecular.
Durante a página SDS, as proteínas são misturadas com SDS. SDS desdobra proteínas em uma forma linear e as cobre com uma carga negativa proporcional à sua massa molecular. Devido à carga negativa, as moléculas de proteínas migram para a extremidade de carga positiva do gel e separam-se de acordo com suas massas moleculares. Na página SDS, a poliacrilamida é utilizada como suporte sólido para o gel. A separação real das proteínas depende principalmente das propriedades do gel. Assim, a preparação de gel de poliacrilamida deve ser cuidadosamente feita e as concentrações corretas de poliacrilamida devem ser usadas. Os géis de poliacrilamida apresentam alta resolução do que os géis de agarose. Portanto, a página SDS é considerada uma técnica de alta resolução para a separação de proteínas.
SDS Page é um tipo de eletroforese em gel desnaturante. Tem uma grande limitação na análise de proteínas. Uma vez que a SDS desnatura as proteínas antes da separação, não permite a detecção de atividade enzimática, interações de proteínas, cofactores de proteínas, etc.
Figura 02: página SDS
Qual a diferença entre a eletroforese em gel e a página SDS?
- diff Artigo Médio antes da Tabela ->
Gel Electroforese vs SDS Page |
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| A eletroforese em gel é um método realizado para separar macromoléculas usando um campo elétrico. | SDS Page é uma técnica de eletroforese em gel de alta resolução utilizada para separar proteínas com base na sua massa. |
| Gel Run | |
| Pode ser realizada de forma horizontal ou vertical. | A página SDS sempre corre verticalmente. |
| Base para Separação | |
| A separação ocorre de acordo com a carga e o tamanho. | A separação de proteínas ocorre de acordo com a massa e a carga. |
| Resolução | |
| A eletroforese em gel de agarose tem baixa resolução e a eletroforese em gel de poliacrilamida tem uma resolução maior | A página SDS tem uma resolução melhor. |
| Desnaturação | |
| A eletroforese em gel inclui técnicas desnaturantes e não desnaturantes. | A página SDS desnatura as proteínas antes da separação. |
Resumo - Electroforese em gel vs SDS Page
A eletroforese em gel é uma técnica comum utilizada para a separação e análise de DNA, RNA e proteínas com base no tamanho e carga. Existem dois tipos principais de eletroforese em gel, nomeadamente eletroforese em gel de agarose e eletroforese em gel de poliacrilamida. Os géis de agarose são utilizados principalmente para a separação de ácidos nucleicos; Quando é necessária maior resolução, são utilizados géis de poliacrilamida. SDS Page é um tipo de eletroforese em gel comumente usado para separar misturas complexas de proteínas. É considerada como uma técnica de separação de proteínas de alta resolução. Esta é a diferença entre a eletroforese em gel e a página SDS.
Referências:
1. Nowakowski, Andrew B., William J. Wobig e David H. Petering. "SDS-PAGE nativa: separação eletroforética de alta resolução de proteínas com retenção de propriedades nativas, incluindo iões de metal encadernados. www. ncbi. nlm. nih. gov. N. p., Maio de 2014. Web. 7 de abril de 2017
2. Stellwagen, Nancy C. "Eletroforese do DNA em géis de agarose, gel de poliacrilamida e em solução livre. "Eletroforese. U. S. Biblioteca Nacional de Medicina, junho de 2009. Web. 07 Abr. 2017
Cortesia da imagem:
1. "Gelelektrophoreseapparatur" (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia
2. "DNA Agorose gel electroforese" pela Escola de Recursos Naturais de Ann Arbor - Laboratório de DNA (CC BY 2. 0) via Commons Wikimedia
