Diferença entre vetores YAC e BAC | Vetores de YAC versus BAC

Anonim

Diferença-chave - vetores YAC vs BAC

Os vetores são utilizados na clonagem molecular. Um vetor pode ser definido como uma molécula de DNA que se comporta como um veículo para transportar material genético estrangeiro para outra célula. Um vetor contendo DNA estranho é conhecido como DNA recombinante e deve ter a capacidade de replicar e expressar dentro do organismo hospedeiro. cromossomo artificial de fermento (YAC) e cromossoma artificial bacteriano (BAC) são dois tipos de vetores envolvidos na clonagem. A principal diferença entre YAC e BAC é que YAC é um sistema de vetores construído artificialmente usando uma região específica de cromossomo de levedura para inserir grandes segmentos de materiais genéticos em células de leveduras enquanto BAC é um sistema vetorial artificialmente construído usando uma região específica de E. coli cromossomo para inserir grandes segmentos de DNA em E. células coli.

ÍNDICE

1. Visão geral e diferença de chave

2. O que são vetores YAC

3. O que são vetores BAC

4. Comparação lado a lado - vetores YAC vs BAC

5. Resumo

O que são vetores YAC?

YAC (cromossoma artificial de fermento) é um cromossomo artificialmente construído que possui a capacidade de transportar um grande segmento de DNA estranho e replicar dentro das células de levedura. Tem um centromere, telômeros e sequências de replicação autônomas que são essenciais para replicação e estabilidade. O YAC também deve ter um marcador seletivo ou marcadores e locais de restrição para torná-lo um vetor de clonagem eficaz. Uma grande seqüência variando de 1000 kb a 2000 kb pode ser inserida em YAC e transferida para levedura. A eficiência de transformação do YAC é muito baixa.

Figura 01: vetor YAC

O que são vetores BAC?

O cromossomo artificial bacteriano (BAC) é um cromossomo artificialmente construído para a clonagem molecular. Possui regiões específicas de E. plasmídeo coli F e é circular e super enrolado. BAC é desenvolvido para clonar fragmentos de DNA em bactérias, especialmente para E. coli. Pode conter fragmentos de DNA com tamanhos até 300 kb. Em comparação com o YAC, as inserções de clonagem BAC são menores nos tamanhos. Os BACs foram desenvolvidos em 1992 e ainda é popular devido à sua estabilidade e facilidade de construção. Os BAC também são úteis no desenvolvimento de vacinas.

Figura 02: Vector BAC em clonagem molecular

Qual a diferença entre vetores YAC e BAC?

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Vetores YAC vs BAC

YAC é um cromossomo de engenharia genética com o uso de DNA de levedura para fins de clonagem. BAC é uma molécula de DNA geneticamente modificada usando E. coli DNA para fins de clonagem.
Sexo
Os YACs foram projetados para clonar grandes fragmentos de DNA genômico em leveduras. BACs foram desenvolvidos para a clonagem de grandes fragmentos genômicos em Escherichia coli.
Comprimento da inserção
Os YAC podem conter inserções genômicas de tamanho megabase. (1000 kb - 2000 kb). Os BACs podem transportar inserções de 200-300 kb ou menos.
Construção
O DNA de YAC é difícil de purificar intacto e requer alta concentração para gerar o sistema de vetor YAC. BAC é fácil de purificar intacta e pode ser facilmente construído.
Quimerismo
Os YACs são frequentemente quiméricos. Os BAC raramente são quiméricos.
Estabilidade
YAC é instável. BAC é estável.
Modificações
A recombinação de fermento é muito viável e permanece sempre ativa. Por isso, pode gerar deleções e outros rearranjos em um YAC. E. A recombinação de coli é impedida e é ativada quando necessário. Por isso, reduz os rearranjos indesejados em BACs.
Manutenção
Manipular YACs recombinantes geralmente requer que YAC seja transferido para E. coli para posterior manipulação. Por isso, é um processo laborioso. A modificação BAC ocorre diretamente em E. coli. Portanto, não há necessidade de transferência de DNA. Portanto, o processo não é laborioso.

Sumário - YAC vs BAC Vectors

YAC tornou-se uma ferramenta de pesquisa essencial em processos de clonagem devido à sua capacidade de clonar grandes fragmentos de DNA no organismo hospedeiro. No entanto, os YACs têm várias desvantagens como vetores como dificuldades de construção, quimerismo, instabilidade, etc. Portanto, para superar esses problemas, os cientistas desenvolveram vetores BAC. BAC foi construído usando regiões específicas de E. coli cromossomo. É um vetor estável e pode ser facilmente construído. No entanto, o comprimento de DNA que BAC pode lidar é até 20 vezes menor que o de YAC. Esta é a diferença entre os sistemas vetoriais YAC e BAC. Hoje em dia, o BAC é mais preferido em relação ao YAC nos laboratórios.

Referências

1. Shero, J. H., M. McCormick, S. E. Antonarakis e P. Hieter. "Virais vetores cromossomos artificiais para manipulação e mapeamento de clones eficientes. "Genômica. U. S. Biblioteca Nacional de Medicina, junho de 1991. Web. 25 de março de 2017

2. Ramsay, M. "Clonagem de cromossomos artificiais de fermento. "Biotecnologia molecular. U. S. Biblioteca Nacional de Medicina, abril de 1994. Web. 25 de março de 2017

Cortesia da imagem:

1. "BACs clonando vetores Chem114A" Por Tinastella - (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia