Diferença entre Nitrocelulose e PVDF | Nitrocelulose vs. PVDF

Diferença-chave - Nitrocelulose vs PVDF

Western blot é um método que permite a detecção e quantificação de proteínas específicas a partir de uma amostra de proteína. A confiabilidade da técnica depende da seleção de uma membrana correta para absorção de proteínas do gel. Existem diferentes tipos de membranas microporosas. As membranas de nitrocelulose e PVDF são duas dessas membranas preferidas pelos pesquisadores devido aos seus atributos especiais sobre os outros tipos de membranas. A seleção entre nitrocelulose ou PVDF também é outro desafio na transferência de Western. Tanto a nitrocelulose como o PVDF possuem alta capacidade de absorção de proteínas. A principal diferença entre nitrocelulose e membrana de PVDF é que membranas de nitrocelulose não têm a capacidade de retirar anticorpos e reutilizar a membrana para reproposar anticorpos, enquanto que as membranas de PVDF têm capacidade de remoção e reutilização .

ÍNDICE

1. Visão geral e diferença de chave

2. O que é Nitrocelulose

3. O que é PVDF

4. Comparação lado a lado - Nitrocelulose versus PVDF

5. Resumo

O que é Nitrocelulose?

A nitrocelulose é um polímero fabricado pelo tratamento de celulose com ácido nítrico e é usado para produzir membranas microporosas em biologia molecular, especialmente para técnicas de mancha, como manchas do sul, norte e oeste. Os tamanhos de poros das membranas de nitrocelulose variam de 3 a 20 μm. As membranas microporosas de nitrocelulose facilitam a detecção de reação imunoquímica na superfície da membrana. Portanto, as membranas de nitrocelulose são freqüentemente usadas para imobilização de proteínas e detecção de proteínas específicas em Western Blot. As membranas de nitrocelulose também podem imobilizar glicoproteínas e ácidos nucleicos.

As membranas de nitrocelulose são preferidas nos ensaios de fluxo lateral devido a várias características. As membranas de nitrocelulose absorvem proteínas em alta concentração. O solvente utilizado para molhar a membrana não diminui a absorção da proteína da membrana de nitrocelulose. As membranas de nitrocelulose podem ser facilmente cortadas para o tamanho de gel desejado e transferir proteínas do gel para a membrana por transferência elétrica ou capilar. A nitrocelulose permite um fluxo de proteínas mais rápido através da membrana com alto potencial de ligação. A nitrocelulose mostra uma força melhorada de manuseio. Outro atributo especial da membrana de nitrocelulose é que pode ser facilmente colado com adesivos não resistentes à água e resistente a água em vários apoios de plástico.

Figura 01: Membrana de nitrocelulose para Western blot

O que é PVDF?

O difluoreto de polivinilideno (PVDF) é fluoropolímero produzido pela polimerização de difluoreto de vinilideno e possui uma elevada capacidade de imobilização de proteínas. Portanto, as membranas microporosas feitas a partir de PVDF são utilizadas em técnicas de transferência de Western para analisar proteínas específicas a partir das misturas de proteínas. As membranas de PVDF também podem ser usadas para análise de aminoácidos e sequenciação de proteínas. A característica mais importante da membrana de PVDF sobre a membrana de nitrocelulose é que pode ser facilmente retirada dos anticorpos e reutilizada para subsequentes sondas de anticorpos.

As membranas PVDF são mais espessas do que as membranas de nitrocelulose; portanto, mais resistente aos danos durante a reutilização. As membranas PVDF são altamente hidrófobas. Portanto, eles devem ser embebidos em metanol ou isopropanol antes de serem utilizados.

Qual a diferença entre Nitrocelulose e PVDF?

- diff Artigo Médio antes da Tabela ->

Nitrocelulose vs PVDF
A nitrocelulose é um polímero composto de celulose.	PVDF é um fluoropolímero produzido pela polimerização de difluoreto de vinilideno.
Tamanho da porção da membrana
Os tamanhos típicos dos poros são 0. 1, 0. 2 ou 0. 45μ	Os tamanhos típicos dos poros são 0. 1, 0. 2 ou 0. 45μm
Capacidade de ligação das proteínas A nitrocelulose tem uma capacidade de ligação à proteína de 80 a 100 μg / cm
2 . PVDF tem uma capacidade de ligação de proteína de 170 a 200 μg / cm	2 . Sensibilidade
Isto tem uma baixa sensibilidade em relação ao PVDF.
Isso tem uma alta sensibilidade.	Detecção de proteínas com pouca expressão
Uma vez que a sensibilidade é baixa em membranas de nitrocelulose, não é adequado para a detecção de proteínas de baixa expressão.
Isto é mais adequado para a detecção de proteínas de baixa expressão devido à sua alta sensibilidade.	Ruído de fundo
Isso tem menor ruído de fundo
Isso tem um ruído de fundo maior.	Interações com proteínas
As moléculas de proteína se ligam a membranas de nitrocelulose através de interações hidrofóbicas.
As proteínas se ligam às membranas PVDF através de interações hidrofóbicas e dipolares.	Natureza da Membrana
A nitrocelulose é frágil e frágil. No entanto, versões de nitrocelulose estão disponíveis e são resistentes.
PVDF é mais durável e tem maior resistência química.	Capacidade de tira e reutilizar
A nitrocelulose pode ter dificuldade em descascar e reprovar sem perder o sinal.
O PVDF é ideal para aplicações de reprovação e sequenciação.	Adequação
A nitrocelulose é ideal para detectar proteínas de baixo peso molecular.
O PVDF é mais adequado para a detecção de proteínas de maior peso molecular.	Outros usos
A nitrocelulose pode ser usada para análises de ácidos nucleicos e manchas de pontos / ranhuras.
PVDF pode ser usado para seqüenciamento de proteínas e sistemas de ensaios em fase sólida.	Custo
Isto é mais barato do que as membranas de PVDF.
Isto é mais caro do que as membranas de nitrocelulose.	Necessidade de pré-molhante
As membranas de nitrocelulose não requerem pré-tratamento com metanol
As membranas de PVDF requerem pré-tratamento com metanol.	Resumo - Nitrocelulose vs PVDF

As membranas de nitrocelulose foram as primeiras membranas utilizadas comercialmente para o ensaio de fluxo lateral. Eles têm uma grande capacidade de absorção de proteínas. Portanto, as membranas de nitrocelulose são usadas no Western Blot. O PVDF é outro tipo de membrana utilizada no Western Blot e também possui uma alta capacidade de absorção de proteínas. Ambos os tipos são utilizados no western blot para análise de proteínas. No entanto, as membranas PVDF têm atributos mais especiais, tornando-os mais adequados do que as membranas de nitrocelulose para Western Blot. Mas, as membranas de nitrocelulose são mais adequadas para a detecção de proteínas ponderadas de baixo peso molecular, as membranas de PVDF são mais adequadas para a detecção de proteínas ponderadas de alto peso molecular. Esta é a diferença entre membranas de nitrocelulose e PVDF.

Cortesia da imagem:

1. "Western blot transfer" Por Bensaccount na Wikipedia em inglês (CC BY 3. 0) via Commons Wikimedia

Referência:

1. Luque-Garcia, Jose L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun e Thomas A. Neubert. "Uso de membranas de nitrocelulose para a caracterização de proteínas por espectrometria de espião assistida por laser / Espectrometria de massa de ionização. " Química Analítica. U. S. Biblioteca Nacional de Medicina, 15 de julho de 2006. Web. 28 de março de 2017

2. "Molecular Markers and Plant Biotechnology. "Google Livros. N. p., n. d. Rede. 28 de março de 2017

3. Segunda-feira, 8 de abril de 2013 Tweet. "The Magic's In Membrane: Escolha com sabedoria os resultados da Best Western Blot. "Biocompareiro. N. p., 08 de abril de 2013. Web. 28 de março de 2017