Diferença entre o marcador selecionável e o gene Reporter | Marcador selecionável vs Repórter Gene

Anonim

Diferença-chave - Marcador selecionável vs Reportagem Gene

A técnica de engenharia genética é usada para transferir genes importantes do organismo para outro organismo. A inserção de um gene estranho no genoma de outro organismo e tornando-o expresso dentro da célula hospedeira são passos mais difíceis na transferência de genes. Para detectar o sucesso do processo de transformação, um marcador selecionável e um gene repórter são usados ​​na molécula recombinante. Um marcador seleccionável é uma sequência de ADN ou um gene que expressa e selecciona as células transformadas das células não transformadas. Um gene repórter é outro gene que é usado para distinguir células transformadas e para quantificar ou detectar como o gene inserido funciona dentro do hospedeiro. A principal diferença entre o marcador selecionável e o gene repórter é que o marcador selecionável é usado para rastrear as células não transformadas e para sinalizar as células transformadas enquanto o gene repórter é usado para quantificar o nível de expressão gênica dentro do hospedeiro.

ÍNDICE

1. Visão geral e diferença de chave

2. O que é Marcador Selecionável

3. O que é Reporter Gene

4. Comparação lado a lado - Marcador selecionável vs Reportagem Gene

5. Resumo

O que é um Marcador Selecionável?

Na engenharia genética, o gene de interesse é inserido em um vetor adequado e transformado em organismos hospedeiros. No entanto, a transformação é bem sucedida apenas nas células hospedeiras competentes, e existe a possibilidade de células hospedeiras rejeitar a absorção de DNA estranho. Portanto, a diferenciação das células transformadas e não transformadas é importante para continuar com a experimentação adicional. Por isso, os pesquisadores incorporam um gene marcador selecionável para o vetor para facilitar a seleção das células transformadas a partir de células não transformadas. Um marcador selecionável é uma sequência de DNA, especialmente um gene útil na identificação das células transformadas. Este gene marcador apresenta uma característica que se adapta a uma seleção artificial de células transformadas a partir de células não transformadas em uma mídia.

Os marcadores selecionáveis ​​mais comuns utilizados na biologia molecular são genes resistentes aos antibióticos. Um gene de resistência aos antibióticos é inserido no vetor e transformado em células hospedeiras especialmente para a bactéria hospedeira. Esse antibiótico particular é incorporado no meio de crescimento da bactéria. Devido à presença do marcador seletivo, nas condições seletivas, apenas as células que contêm o marcador selecionável apropriado podem sobreviver.As células não transformadas são incapazes de crescer no meio contendo antibióticos. Portanto, devido ao marcador selecionável que é resistente a antibióticos, as células transformadas são facilmente identificadas.

Os genes que conferem características para antimetabolitos, herbicidas são utilizados como marcadores seletivos em vetores de clonagem em engenharia genética de plantas. No entanto, essa cotransformação de marcadores seletivos em organismos geneticamente modificados tem efeitos negativos sobre o meio ambiente e sobre o ser humano. A liberação de bactérias resistentes a antibióticos pode aumentar a resistência a antibióticos de patógenos humanos. Pode contaminar o produto ou a biomassa por antibióticos e pode perder a pressão seletiva como resultado da degradação e inativação de antibióticos.

Figura 01: vetor de plasmídeo para transferência de genes com marcador selecionável

O que é um gene Reporter?

Os genes Reporter são genes que permitem a detecção ou medição da expressão do gene inserida. Esses genes repórter podem ser anexados a seqüências reguladoras do gene de interesse para sinalizar a localização ou os níveis de expressão. Portanto, durante a expressão de genes sob o mesmo promotor, eles são transcritos em uma única sequência de mRNA e depois traduzidos para uma proteína que pode indicar o nível de expressão gênica.

Os genes repórter são de vários tipos e contêm características visivelmente identificáveis ​​que geralmente estão envolvidas em proteínas fluorescentes e luminescentes. Os genes que codificam proteínas e enzimas fluorescentes, convertem substratos invisíveis em produtos luminosos ou coloridos, sinalizando a expressão bem sucedida do gene e dando a oportunidade de quantificar a expressão gênica.

Figura 02: Expressão de um gene repetente

Qual a diferença entre o marcador selecionável e o gene Reporter?

- diff Artigo Médio antes da Tabela ->

Marcador Selecionável vs Repórter Gene

O marcador selecionável é um tipo de seqüência de DNA que ajuda a distinguir células transformadas com células não transformadas. O gene Reporter é um gene que ajuda a quantificar a expressão do gene desejado inserido na célula hospedeira.
Natureza das unidades produzidas
Os genes são codificados com características que ajudam na seleção artificial de meios de cultivo. Os genes são codificados com características visivelmente identificáveis.
Uso
Os genes de resistência a antibióticos, os genes antimetabolitos, os genes de resistência aos herbicidas, etc. são exemplos para o marcador selecionável. O código dos genes para proteína fluorescente verde, β-glucuronidase, Cloramfenicol acetiltransferase, proteína fluorescente vermelha, etc. são exemplos.

Resumo - Marcador Selecionável vs Reportagem Gene

Os marcadores selecionáveis ​​permitem que as células transformadas cresçam em meio seletivo com antibiótico ou herbicida particular. Eles são usados ​​para seleção precoce de células transformadas. Os genes repórter são usados ​​para quantificar o nível de expressão do gene desejado inserido. Eles também permitem a diferenciação de células transformadas e não transformadas. Esta é a diferença entre o marcador selecionável e o gene repórter.Tanto o marcador selecionável quanto o gene repórter são considerados marcadores importantes na engenharia genética.

Referências:

1. Ziemienowicz, Alicja. "Marcadores selecionáveis ​​de plantas e genes repórteres. "SpringerLink. Springer-Verlag, n. d. Rede. 23 de março de 2017.

2. Shih, Chen-Han, Hsiao-Yin Chen, Hung-Chieh Lee e Huai-Jen Tsai. "O gene Purple Chromoproteína serve como um novo marcador de seleção para a transgênese da Microalga Nannochloropsis oculata. "PLOS ONE. Public Library of Science, n. d. Rede. 25 de março de 2017

Cortesia da imagem:

1. "Plasmídeo com inserção" Por Michael Jeltsch - Trabalho próprio (CC BY-SA 4. 0) via Commons Wikimedia

2. "Gene Reporter" Por TransControl em en. wikipedia (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia