Diferença entre YAC e M13 Phage Vector | YAC vs M13 Phage Vector
Diferença-chave - YAC vs M13 Phage Vector
A clonagem de DNA é um processo importante que permite a propagação de importantes fragmentos de DNA de organismos. Exige a união de DNA específico com DNA vetorial para criar DNA recombinante que se transforme em organismo hospedeiro. Um vetor é uma molécula de DNA que se comporta como um veículo para transportar material genético estrangeiro para outra célula ou organismo. Deve ser capaz de replicar dentro do organismo hospedeiro e produzir múltiplas cópias de DNA recombinante. Existem diferentes tipos de vetores utilizados na clonagem de DNA. Os cromossomos artificiais de fermento (YAC) e o vetor de fago M13 são dois tipos entre eles. A principal diferença entre o vetor de fago YAC e M13 é que YAC é um cromossomo artificial que se replica em células de levedura enquanto vetor de fago M13 é um DNA circular de cadeia simples do bacteriófago M13 que se replica em E Células Coli.
ÍNDICE
1. Visão geral e diferença de chave
2. O que é YAC
3. O que é M13 Phage Vector
4. Comparação de lado a lado - YAC vs M13 Phage Vector
5. Resumo
O que é um vetor YAC?
O YAC é um cromossomo artificialmente construído que possui a capacidade de transportar um grande segmento de DNA estranho e replicar dentro das células de levedura. Tem centromere, telómero e seqüências replicantes autônomas essenciais para replicação e estabilidade. O YAC também deve ter um marcador seletivo ou marcadores e locais de restrição para torná-lo um vetor de clonagem eficaz. Grandes sequências que variam de 1000 kb a 2000 kb podem ser inseridas em YAC e transferidas para levedura.
Figura 01: vetor YAC
O que é M13 Phage Vector?
Bacteriophage M13 é um vírus que infecta e replica em E Coli. O genoma do bacteriófago M13 é de tamanho pequeno, cerca de 6 7 kb. É um DNA de sentido único, circular e de sentido positivo. Este vírus infecta especificamente bactérias E Coli através de F pilus. Uma vez que ele entra no ssDNA na bactéria, sintetiza sua cadeia complementar e se torna dsDNA ou a forma replicativa (RF) de M13. RF pode se comportar como um plasmídeo dentro do organismo hospedeiro. O dsDNA replica dentro de E Coli e produz ssDNA com novos fagos. Estes novos fagos são continuamente lançados a partir do E Coli sem matar a célula hospedeira. No entanto, a infecção retarda o crescimento de E Coli. O dsDNA pode ser extraído de células bacterianas e usado como vetores na clonagem de DNA.Eles são conhecidos como vetores de fago M13. Eles podem ser facilmente manipulados e usados de maneira semelhante aos vetores plasmídicos.
A capacidade inerente de infecção desses fagos M13 serve como uma boa qualificação para ser usada como vetor na clonagem de genes. Ao desenvolver M13 em um vetor, vários elementos devem ser incorporados em seu genoma. Eles são, um gene para a proteína lac repressor (lac I), a região operador-proximal do gene lac Z, um promotor lac e um site de clonagem múltipla (polylinker). Quando dsDNA do M13 é usado como vectores, ele pode ser tratado como um vetor plasmídico. No entanto, o uso de ssDNA M13 tem vantagens na seqüência de DNA e mutagênese direcionada ao site.
Uma vez que o vetor de fago M13 tem um site de clonagem múltiplo na região lacZ, os vetores recombinados podem ser facilmente identificados pela triagem de colônia azul / branca em placas de ágar contendo IPTG e X-Gal. As placas azuis produzidas nas placas não contêm os fagos recombinados. Portanto, os fagos com inserções podem ser selecionados para fins de clonagem.
Figura 02: Bacteriophage M13
Qual a diferença entre YAC e M13 Phage Vector?
- diff Artigo Médio antes da Tabela ->
YAC vs M13 Phage Vector |
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| YAC é um cromossomo de engenharia genética que tem a capacidade de transportar um grande segmento de DNA estranho e replicar dentro das células de levedura. | O vetor de fago M13 é um vetor viral desenvolvido pelo bacteriófago M13 que é usado para inserir DNA estranho em E Coli. |
| Objetivo | |
| Os YACs foram projetados para clonar grandes fragmentos de DNA genômico em leveduras. | Os vetores de fago M13 são usados para inserir DNA estranho em E Coli. |
| Comprimento da inserção | |
| Os YAC podem conter inserções genômicas de tamanho megabase (1000 kb - 2000 kb). | O tamanho das inserções é de cerca de 1, 500 bps. |
| Construção | |
| O DNA de YAC é difícil de purificar intacto e requer uma concentração elevada para gerar o sistema de vetor YAC. | Ocorre através da corrente eletrônica fotossintética cíclica. |
| Estabilidade | |
| YAC é instável. | Os fagos M13 podem ser facilmente extraídos. |
| Tamanho | |
| As enzimas são moléculas maiores. | Os fagos M13 são estáveis do que o YAC. |
Resumo - YAC vs M13 Phage Vector
YAC é um sistema de vetores construído artificialmente usando uma região específica de cromossomo de levedura para inserir grandes segmentos de material genético em células de levedura. O vetor de fago M13 é um sistema de vetor derivado do bacteriófago M 13 que usa E coli como organismo hospedeiro. Esta é a principal diferença entre YAC e M13 Phage Vector. Ambos são igualmente úteis na tecnologia de DNA recombinante e na clonagem de genes.
Referência:
1. "Vetor. "Genetics-notes - Vector. N. p., n. d. Rede. 16 de maio de 2017. // genetics-notes. wikispaces. com / Vector
2. "Levedo cromossomo artificial. "Wikipedia. Wikimedia Foundation, 21 de abril de 2017. Web. 16 de maio de 2017.
Cortesia da imagem:
1. "M13B" Por J3D3 - Trabalho próprio (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia
