Diferença entre Taq Polymerase e DNA Polymerase | Taq Polymerase vs DNA Polymerase
Diferença-chave - Taq Polymerase vs DNA Polymerase
DNA polimerase é uma enzima que cria novo DNA a partir de seus blocos de construção (nucleotídeos). Nos procariotas e eucariotas, são encontrados diferentes tipos de ADN polimerases. A duplicação de DNA é viável devido à presença dessas enzimas especiais, e a informação genética é passada para a prole pela ação das polimerases de DNA. Taq polimerase é um tipo especial de DNA polimerase que é termostável e é amplamente utilizado na PCR. Taq polimerase é encontrada em bactérias termófilas e purificada em in vitro replicação do DNA. A diferença-chave entre Taq polimerase e DNA polimerase é que Taq polimerase pode suportar altas temperaturas sem desnaturação enquanto outras DNA polimerases desnaturalizam a altas temperaturas (em temperaturas de degradação de proteína).
ÍNDICE
1. Visão geral e diferença de chave
2. O que é Taq Polymerase
3. O que é DNA Polymerase
4. Comparação lado a lado - Taq Polymerase vs DNA Polymerase
5. Resumo
O que é Taq Polymerase?
Taq polymerase (Taq DNA polymerase ) é uma enzima usada para sintetizar DNA in vitro por técnica de PCR. É produzido pela bactéria termófila chamada Thermus aquaticus que vive em fontes termais e aberturas térmicas. Taq polimerase é uma enzima termoestável que não se degrada a altas temperaturas. A Taq polimerase foi purificada pela primeira vez e publicada em Chien et al. em 1976. A técnica de PCR é realizada com a ajuda da Taq polimerase devido à sua capacidade de tolerar altas temperaturas e flutuações de temperatura durante a PCR. A Taq polimerase catalisa a síntese de DNA quando existem primers, nucleotídeos e DNA simples de cadeia simples. A enzima consiste num único polipéptido com um peso molecular de aproximadamente 94 kDa. Taq polimerase mostra a sua actividade óptima a 80 ° C e a uma gama de pH de 7-8 com a presença de íons de magnésio. Possui atividade polimerase e exonuclease. A enzima é composta por uma única cadeia polipeptídica e o gene da Taq polimerase contém alto teor de G e C (67,9%).
A polimerase Taq termostática permite a realização de PCR a altas temperaturas, o que aumenta a especificidade dos iniciadores e a redução da produção de produtos de PCR indesejados (dímeros de iniciadores). Taq polimerase também elimina a necessidade de adicionar novas enzimas à reação de PCR após cada ciclo de reação de PCR devido à sua capacidade de suportar altas temperaturas.A descoberta da polimerase Taq permitiu que a PCR funcionasse em um único tubo fechado em uma máquina relativamente simples. Devido a estas propriedades da Taq polimerase, a PCR torna-se uma técnica de laboratório popular rotineiramente realizada em muitas análises de biologia molecular referentes à análise de DNA.
Taq polimerase é amplamente utilizada em técnicas de biologia molecular, e há uma necessidade de produção de polimerase Taq em grande escala. Portanto, usando a tecnologia de DNA recombinante e a clonagem de genes, o gene que codificou a polimerase de DNA Taq foi clonado e expresso em Escherichia coli. Isso facilitou muito a produção de polimerase Taq recombinante e reduziu o preço desta enzima para uso adequado.
Figura 1: Taq Polymerase
O que é DNA Polymerase?
DNA polimerase é uma enzima que catalisa a síntese de DNA de nucleotídeos. É a enzima mais precisa responsável por duplicar genomas e transmitir informações genéticas à prole. Durante a divisão celular, DNA polimerase duplica todo o seu DNA e passa uma cópia para cada célula filha. Em 1955, Arthur Kornberg foi descoberto ADN polimerase em E Coli. A função da DNA polimerase depende de vários requisitos; ADN modelo, Mg +2 , todos os quatro tipos de desoxinucleótidos (dATP, dTTP, dCTP e d GTP) e uma pequena sequência de ARN (iniciador). A síntese do DNA é feita na direcção de 5'a 3 'por ADN polimerase.
As polimerases de DNA podem ser agrupadas em sete famílias diferentes: A, B, C, D, X, Y e RT (Transcriptase reversa). Retroviruses codificam para RT; uma polimerase de DNA incomum que precisa de um modelo de ARN para a síntese de DNA. Existem cinco tipos diferentes de polimerases de DNA encontradas em procariotas para diferentes papéis na replicação do DNA. A DNA polimerase 3 é responsável pela polimerização da nova cadeia de DNA. DNA polymerase 1 é responsável por reparar e corrigir o DNA. As DNA polimerases 2, 4 e 5 são responsáveis pela reparação e revisão de DNA. Em eucariotas, existem 15 tipos distintos de DNA polimerases. Eles incluem cinco grandes famílias.
Figura 2: DNA Polymerase
As polimerases de DNA são usadas na clonagem de genes, PCR, seqüenciamento de DNA, detecção de SNP, diagnóstico molecular, etc. A Taq polimerase é um tipo de DNA polimerase que pode tolerar altas temperaturas e estar disponível para Síntese de DNA sem degradação.
Qual a diferença entre Taq Polymerase e DNA Polymerase?
- diff Artigo Médio antes da Tabela ->
Taq Polymerase vs DNA Polymerase |
|
| Taq DNA polymerase é uma enzima que cria DNA. É uma enzima termoestável encontrada em termófilos | DNA polimerase é uma enzima que facilita a replicação de DNA e encontrada em organismos procarióticos e eucarióticos. |
| Degradação em Temperaturas Elevadas | |
| A Taq polimerase é ativa a altas temperaturas. | DNA polimerase degrada-se em proteínas desnaturando altas temperaturas. |
| Use | |
| Isto é amplamente utilizado em PCR | Taq polimerase substituiu a polimerase de ADN de coli originalmente utilizada em PCR. |
Resumo - Taq Polymerase versus DNA Polymerase
As polimerases de DNA são as enzimas que sintetizam DNA de desoxinucleótidos (blocos de construção de DNA) quando o modelo e os iniciadores estão disponíveis. As DNA polimerases são necessárias para duplicar o DNA das células e passar para células filhas idênticas durante a divisão celular. As polimerases de DNA adicionam novos nucleotídeos à extremidade 3 'do iniciador e alongam a nova síntese da cadeia de DNA na direção 5' a 3 '. A ADN polimerase de Taq é uma enzima de DNA polimerase que é altamente útil no método de reação em cadeia da polimerase (PCR) da amplificação do DNA. E. Coli ADN polimerase 1 foi utilizada anteriormente para PCR, mas a Taq polimerase comercial suplantou-a devido à sua elevada especificidade da ligação do iniciador a temperaturas elevadas e a produção de um maior rendimento do produto desejado com menos produto de amplificação não específico. Esta é a diferença entre Taq Polymerase e DNA Polymerase.
Referência:
1. Ishino, Sonoko e Yoshizumi Ishino. "DNA polimerases como reagentes úteis para a biotecnologia - a história da pesquisa de desenvolvimento no campo. "Fronteiras em microbiologia". Frontiers Media S. A., 2014. Web. 28 de fevereiro de 2017
2 "Taq e outras polimerases de DNA termostável". Springer. Springer Holanda, 01 de janeiro de 1970. Web. 28 de fevereiro de 2017
3. Stillman, Bruce. "DNA polimerases no garfo de replicação em Eucariotas. "Célula molecular. Biblioteca Nacional dos EUA, 09 de maio de 2008. Web. 28 de fevereiro de 2017
4. EucarióticasDNAPolimerases - Universidade de Oxford." N. p., e Web. 28 de fevereiro de 2017
Imagem Cortesia:
1. "Taq" Por Adenosina - Trabalho próprio (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia
2. "DNA polymerase" Por Yikrazuul - Trabalho próprio (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia
